Microsgopeg Biolegol ar gyfaint y blociau o samplau meinwe
Hyd yn hyn, mae cryofixation, rhannu ultra-denau wedi'i rewi, a sychu rhewi yn ddulliau arferol ar gyfer microsgopeg pelydr-X o feinweoedd a chelloedd. Rhowch y manylion canlynol ynglŷn â'r dull hwn:
Gall microsgop biolegol gyda chwyddwydr symud y chwyddwydr i fyny ac i lawr i gyflawni disgleirdeb cymedrol, a gellir newid agorfa'r agorfa amrywiol hefyd i gyflawni disgleirdeb cymedrol. Os yw'r golau o'r haul, gellir codi'r chwyddwydr yn briodol a gellir ehangu agorfa'r golau amrywiol yn briodol. Os yw'r golau'n rhy gryf, gellir gostwng y chwyddwydr yn briodol, a gellir lleihau agorfa'r groesffordd yn briodol. Os ydych chi'n dal i deimlo'n ddisglair yn y sefyllfa hon, gallwch ddewis gosod hidlydd priodol ar y braced o dan y chwyddwydr. Gall y derw hwn gyflawni disgleirdeb sy'n eich bodloni. Wrth gwrs, gall addasu safleoedd uchaf ac isaf y chwyddwydr newid maint agorfa'r darlleniad ysgafn a dewis hidlwyr addas, sy'n gofyn am gyfnod penodol o ymarfer a phrofiad.
Mater pwysig iawn mewn microsgopeg fiolegol yw'r broses o samplu ac ynysu celloedd. Ar ôl rhewi-sychu ac ymgorffori resin (FD), rhaid prosesu'r adrannau ultra-denau wedi'u rhewi yn ofalus i sicrhau nad yw cynnwys 65 elfen pob rhan yn cael ei ddifrodi yn ystod arsylwi a dadansoddi. Oherwydd y camau niferus a chost uchel sy'n gysylltiedig â microanalysis pelydr-X, mae'n rhaid iddo ddod i gasgliadau anghywir os yw'r celloedd a ddadansoddwyd yn cael eu difrodi neu'n farw ar ôl prosesu hirfaith ac aml-gam. Mae dwy ffurf ar y celloedd myocardaidd sydd wedi'u gwahanu gan driniaeth gelatinase, mae un ar siâp gwialen hir a'r llall yn gylchol. Mae'r olaf yn cyfeirio at gelloedd sy'n marw sy'n cael eu difrodi yn ystod y broses o wahanu celloedd.
Mae cynnwys a dosbarthiad electrolytau yn y ddau fath hyn o gell yn wahanol iawn o dan ficrosgop biolegol. Mae NA yn uchel iawn ac mae K yn isel iawn mewn cardiomyocytes crwn, ac mae crynodiad CA mewn dendrites llinol yn uchel iawn. Ar ôl eu gwirio â dulliau dadansoddol eraill, profwyd bod yr NA uchel a'r K isel mewn celloedd crwn a'r CA uchel mewn mitocondria yn ganlyniad niwed i'r bilen wrth wahanu celloedd. Mae'r dull gosod oer ar gyfer celloedd a meinweoedd yn aml yn cynnwys diffodd gyntaf ac yna eu storio mewn nitrogen hylifol. Mae gosodiad quenching yn hanfodol ar gyfer yr effaith gadwraeth. Mae celloedd byw neu feinweoedd ffres yn llawn dŵr, ac wrth eu diffodd, mae'r rhannau o'r celloedd neu'r meinweoedd sy'n dod i gysylltiad uniongyrchol â'r oergell (yn enwedig wrth ddefnyddio nitrogen hylif ar gyfer oeri) yn aml yn cael eu rhewi a'u gosod yn gyntaf, gan ffurfio "cragen" sy'n rhwystro rhan ganolog y celloedd rhag cael eu gwasgu a'u gosod. Felly, wrth gynnal microanalysis pelydr-X, darganfyddir yn aml bod crisialau iâ yn bodoli yn rhan ganolog celloedd mwy. Er mwyn atal y sefyllfa hon rhag digwydd, defnyddir sylwedd â phwynt toddi yn uwch na nitrogen hylif ond yn is gan 806C fel oergell. Mae yna lawer o'r sylweddau hyn, ond maen nhw'n hawdd eu cael ac mae'r rhai mwyaf fforddiadwy yn bropan dwys (berwbwynt 42.120c, pwynt toddi 187.10c, pwysau moleciwlaidd 44.1), sydd hefyd â chyfradd oeri cyflym. Ond ei anfantais yw ei fod yn fflamadwy.
