Biomicrosgopi mewn perthynas â chyfaint y blociau meinwe
Microsgopeg Biolegol Hyd yn hyn, mae gosod oer, toriad ultrathin wedi'i rewi a rhewi-sychu yn ddulliau arferol ar gyfer micro-doriadau pelydr-x meinwe a chelloedd. Mae manylion y dull hwn yn cael eu hesbonio fel a ganlyn:
Ar gyfer microsgopau biolegol gyda chyddwysydd, gellir symud y cyddwysydd i fyny ac i lawr i wneud y disgleirdeb yn gymedrol, a gellir newid agoriad y golau amrywiol hefyd i gyflawni disgleirdeb cymedrol 9b. Os yw'r golau'n heulog, gellir codi'r cyddwysydd yn briodol, a gellir ehangu agoriad y ffynhonnell golau amrywiol yn briodol. Os yw'r golau yn rhy gryf, gellir gostwng y lens cyddwysydd yn briodol, a gellir lleihau agorfa'r golau croestoriadol yn briodol. Os ydych chi'n dal i deimlo'n ddisglair yn yr achos hwn, gallwch ddewis hidlydd priodol a'i roi ar y braced o dan y cyddwysydd. Bydd y dderwen hon yn gallu cael y disgleirdeb sy'n eich bodloni. Wrth gwrs, mae addasu safleoedd uchaf ac isaf y cyddwysydd, addasu maint agorfa'r darlleniad optegol amrywiol a dewis hidlydd addas yn gofyn am gyfnod penodol o ymarfer i ennill profiad.
Mater pwysig iawn mewn microsgopeg biolegol yw bod yn y broses o samplu a gwahanu celloedd, ar ôl rhewi-sychu a mewnosod resin (FD), ar ôl rhewi agregau tra-denau, ac ar ôl rhewi-sychu, cynnwys 65 o elfennau ym mhob rhan. rhaid ei drin yn ofalus. Ni ellir niweidio'r celloedd sydd i'w dadansoddi. Oherwydd bod micro-ddadansoddiad pelydr-X nid yn unig yn cynnwys llawer o gamau, ond hefyd yn costio llawer. Os yw'r celloedd a ddadansoddwyd yn gelloedd difrodi neu gelloedd marw ar ôl amser hir a phrosesu aml-gam, mae'n anffodus iawn dod i gasgliadau anghywir. Er enghraifft, mae gan cardiomyocytes sydd wedi'u gwahanu gan driniaeth collagenase ddau siâp, mae un yn siâp gwialen hir, ac mae'r llall yn grwn. Mae'r olaf yn gelloedd marw sy'n cael eu difrodi yn ystod ynysu celloedd.
Biomicroscopy Mae swm a dosbarthiad yr electrolytau yn y ddau fath hyn o gelloedd yn dra gwahanol. Mae Na yn uchel iawn ac mae K yn isel iawn mewn cardiomyocytes crwn, ac mae crynodiad ca mewn nematodau yn uchel iawn. Ar ôl gwirio gyda dulliau dadansoddi eraill, profir bod y Na uchel a K isel o gelloedd crwn a'r Ca uchel mewn mitocondria oherwydd difrod y gellbilen yn ystod y broses gwahanu celloedd. Y dull sefydlogi oerfel ar gyfer celloedd a meinweoedd fel arfer yw mabwysiadu diffodd a gosod yn gyntaf, ac yna eu storio mewn nitrogen hylifol. Mae gosodiad diffodd yn bwysig iawn ar gyfer effaith cadwraeth. Mae celloedd byw neu feinweoedd ffres yn gyfoethog mewn dŵr. Wrth ddiffodd, mae'r rhannau o'r celloedd neu'r meinweoedd sydd mewn cysylltiad uniongyrchol â'r oergell wedi'i falu (yn enwedig wrth ddiffodd â nitrogen hylifol) yn aml yn cael eu rhewi a'u gosod yn gyntaf, gan ffurfio "cragen", sy'n rhwystro rhannau canolog y celloedd. wedi'i falu ac yn oer-sefydlog. Felly, wrth wneud dadansoddiad micro-ardal X-lein, canfyddir yn aml bod crisialau iâ yng nghanol celloedd mwy. Er mwyn atal hyn rhag digwydd, mae sylwedd gyda phwynt toddi uwch na nitrogen hylifol ond yn is na 806c yn cael ei ddefnyddio fel oergell wedi torri. Mae yna lawer o sylweddau o'r fath, ond yr un rhataf yw propan crynodedig (pwynt berwi - 42.120c, pwynt toddi - 187.10c, pwysau moleciwlaidd 44.1), a'r cyflymder oeri yw'r cyflymaf. Ond ei anfantais yw ei fod yn fflamadwy.
Gall microsgop biolegol roi'r ffibr cyhyrau ar rac arbennig, fel pan fydd y cyfangiad ffibr cyhyr yn cyrraedd cyfnod penodol ac mae angen ei osod, dechreuwch y ffroenell ar unwaith i chwistrellu propan hylif i'r ffibr cyhyrau i ddiffodd a'i drwsio. Yna tynnwyd y ffibrau cyhyrau ynghyd â'r ffrâm allan a'u rhoi mewn nitrogen hylifol. Os ydych chi'n gosod celloedd gwaed neu gelloedd ynysig, canolbwyntiwch y celloedd yn gyntaf trwy allgyrchu ar gyflymder isel, trosglwyddwch y celloedd i ffiol arian gyda dargludedd thermol da, rhowch y ffiol mewn propan hylif, a'i rewi ar gyfer sefydlogi. Wrth osod y pancreas llygod mawr yn labordy Hall, cafodd y ddau floc dur eu hoeri ymlaen llaw â heliwm hylif (neu nitrogen hylifol), a chlampiwyd y ddau floc copr â gefeiliau a'u gosod ar flaen a chefn y pancreas i ddiffodd a thrwsio. y pancreas. Gellir storio meinweoedd neu gelloedd mewn nitrogen hylifol i'w storio yn y tymor hir ar ôl diffodd a gosod.
Microsgopeg Biolegol Yn ogystal â'r dull torri ultrathin wedi'i rewi fwyaf uchel ei barch, dyma dechneg dyddodi arall a ddefnyddir gan wyddonwyr. Ychwanegir sylwedd i ffurfio gwaddod gyda'r gydran i'w ddadansoddi i'w atal rhag symud cyn ei ddadansoddi, ac yna dadansoddir y gwaddod. Er enghraifft, mae pobl yn aml yn defnyddio oxalate a pyroantimonate i adneuo ca mewn celloedd cyhyrau. Nid yw'r cyntaf yn ddigon sensitif i'r crynodiad isel o Ca yn y cytoplasm; mae pyroantimonate yn fwy sensitif a gall ffurfio dyddodion electron-drwchus gyda Ca rhad ac am ddim yn yr ymennydd, ond nid yw pyroantimonate yn gydnaws â sodiwm, manganîs, bariwm, haearn Mae dyddodion hefyd yn cael eu ffurfio ac maent yn llai penodol. Mae'r broses o baratoi sbesimen yn debyg i baratoi sbesimenau adran ultrathin microsgop electron trawsyrru cyffredin, y gwahaniaeth yw bod pyroantimonate potasiwm 3 y cant (hallt byffer ffosffad, pH 7.6) wedi'i osod am 6 awr cyn ei osod, ac ar y rhannau ultrathin cyhyrau lliw, Gwelwyd dyddodion du yn llinellau canol bandiau A a 2 pob sarcomere, a defnyddiwyd darnau heb eu staenio ar gyfer micro-ddadansoddiad pelydr-X. Defnyddiwyd tetrahydrochloride Diaminobenzidine (DAB) i waddodi sylweddau sy'n cynnwys heme ac yn y blaen. Gellir ystyried y cyfuniad o adwaith dyddodiad histocemegol a phont micro-wahaniaethu pelydr-x mewn labordai nad oes ganddynt amodau adran ultrathin wedi'u rhewi. Gellir gwneud lled-meintiol yn ôl uchder brig yr elfennau i'w dadansoddi
