Gwahaniaeth rhwng microsgop fflworoleuedd a microsgop arferol
Yn ddiweddar ceisiais wneud rhai rhannau o lygod wedi'u rhewi. Nesaf, byddaf yn defnyddio microsgop fflworoleuedd i weld a yw'r firws a chwistrellais yn ardal yr ymennydd yr wyf ei eisiau. Mae angen dysgu rhai egwyddorion sylfaenol microsgopeg fflworoleuedd yn fyr, a byddaf yn eu rhannu yma.
Mae microsgopau fflworoleuedd yn defnyddio golau uwchfioled fel ffynhonnell golau i oleuo'r gwrthrych sy'n cael ei archwilio, gan achosi'r gwrthrych i allyrru golau, ac yna arsylwi ar y gwrthrych o dan y microsgop. Fe'i defnyddir yn bennaf ar gyfer celloedd immunofluorescence. Mae'n cynnwys ffynhonnell golau yn bennaf, system plât hidlo a system optegol. Mae delwedd fflwroleuol y sampl yn cael ei arsylwi trwy chwyddo'r sylladur a lens gwrthrychol. Gadewch i ni edrych ar y gwahaniaeth rhwng microsgop fflworoleuedd a microsgop optegol cyffredin.
1. Edrychwch ar y dull goleuo
Yn gyffredinol, mae'r dull goleuo o ficrosgop fflworoleuedd yn epi-oleuo, sy'n golygu bod y ffynhonnell golau yn cael ei roi ar y sampl prawf trwy'r lens gwrthrychol.
2. Edrychwch ar y penderfyniad
Mae microsgopau fflworoleuedd yn defnyddio golau uwchfioled fel ffynhonnell golau, sydd â thonfedd fyrrach ond cydraniad uwch na microsgopau optegol cyffredin.
3. Gwahaniaethau mewn hidlwyr
Mae microsgopau fflworoleuedd yn defnyddio dwy hidlydd arbennig, un a ddefnyddir o flaen y ffynhonnell golau i hidlo golau gweladwy, ac un a ddefnyddir rhwng y lens gwrthrychol a'r sylladur i hidlo pelydrau uwchfioled, a all amddiffyn llygaid dynol.
Mae microsgop fflworoleuedd hefyd yn fath o ficrosgop optegol. Y prif reswm yw bod y donfedd cyffroi gan ficrosgop fflworoleuedd yn fyr, felly mae hyn yn arwain at y gwahaniaeth mewn strwythur a defnydd rhwng microsgop fflworoleuedd a microsgop cyffredin. Mae gan y rhan fwyaf o ficrosgopau fflworoleuedd swyddogaeth dda o ddal golau gwan. , felly mae ei allu delweddu hefyd yn dda o dan fflworoleuedd hynod o wan. Ynghyd â gwelliant parhaus microsgopau fflworoleuedd yn ystod y blynyddoedd diwethaf, mae'r sŵn hefyd wedi'i leihau'n fawr. Felly, mae mwy a mwy o ficrosgopau fflworoleuedd yn cael eu defnyddio.
Gwybodaeth am ficrosgopeg fflworoleuedd dau ffoton
Egwyddor sylfaenol excitation dau ffoton yw: o dan gyflwr dwysedd ffoton uchel, gall moleciwlau fflwroleuol amsugno dau ffoton tonfedd hir ar yr un pryd, ac ar ôl oes cyflwr cynhyrfus byr, fel y'i gelwir, yn allyrru ffoton â thonfedd byrrach. . Mae'r effaith yr un fath â defnyddio ffoton â thonfedd hanner y donfedd hir i gyffroi moleciwlau fflwroleuol. Mae cyffro dau ffoton yn gofyn am ddwysedd ffoton uchel. Er mwyn peidio â difrodi celloedd, mae microsgopau dau ffoton yn defnyddio laserau pwls ynni uchel wedi'u cloi â modd. Mae'r laser hwn yn allyrru golau laser gydag egni brig uchel ac egni cyfartalog isel, gyda lled pwls o ddim ond 100 femtoseconds ac amlder o 80 i 100 MHz. Wrth ddefnyddio lens gwrthrychol agorfa rifiadol uchel i ganolbwyntio ffotonau'r laser pulsed, dwysedd y ffoton wrth ffocws y lens gwrthrychol yw'r uchaf. Dim ond yng nghanol y lens gwrthrychol y mae cyffro dau ffoton yn digwydd, felly nid oes angen twll pin confocal ar y microsgop dau ffoton, sy'n gwella effeithlonrwydd canfod Fflworoleuedd.
Yn y ffenomen fflworoleuedd cyffredinol, oherwydd dwysedd ffoton isel y golau excitation, dim ond un ffoton y gall moleciwl fflwroleuol ei amsugno ar yr un pryd ac yna allyrru un ffoton fflworoleuedd trwy drawsnewidiad ymbelydrol. Fflworoleuedd un ffoton yw hwn. Ar gyfer y broses excitation fflworoleuedd gan ddefnyddio laser fel y ffynhonnell golau, gall ffenomenau fflworoleuedd dau-ffoton neu hyd yn oed aml-ffoton ddigwydd. Yn yr achos hwn, mae dwyster y ffynhonnell golau excitation a ddefnyddir yn uchel, ac mae'r dwysedd ffoton yn bodloni'r gofyniad i'r moleciwlau fflwroleuol amsugno dau ffoton ar yr un pryd. Yn y broses o ddefnyddio laserau cyffredin fel ffynonellau golau excitation, nid yw'r dwysedd ffoton yn ddigon o hyd i gynhyrchu amsugno dau ffoton. Fel arfer defnyddir laserau pwls femtosecond, a gall eu pŵer ar unwaith gyrraedd y lefel megawat. Felly, mae tonfedd fflworoleuedd dau-ffoton yn fyrrach na thonfedd y golau excitation, sy'n cyfateb i'r effaith a gynhyrchir gan excitation tonfedd hanner cyffro.
