Sut mae morffoleg celloedd microbaidd yn cael ei arsylwi o dan ficrosgop?
Dyfeisiwyd microsgopau i weld gwrthrychau gwenu na ellir eu gweld â'r llygad noeth. Mae micro-organebau yn fach iawn, felly mae'n rhaid eu chwyddo a'u harsylwi gyda chymorth microsgop. Yn ogystal, mae yna lawer o fathau o ficro-organebau, felly yn y bôn gall y rhan fwyaf o ficrosgopau optegol arsylwi micro-organebau. Y cwestiwn nesaf yw pa fath o ficrosgop y dylid ei ddefnyddio ar gyfer arsylwi a dadansoddi pa fath o ficro-organebau. Mae microsgopau cyffredin y gellir eu defnyddio i arsylwi morffoleg microbaidd yn cynnwys microsgopau biolegol, microsgopau cyferbyniad cam, microsgopau gwrthdro, microsgopau fflworoleuedd, microsgopau cydffocal, ac ati.
Mae'r canlynol yn disgrifio'r microsgopau amrywiol a ddefnyddir i arsylwi micro-organebau:
1. Mae microsgop optegol cyffredin yn defnyddio golau naturiol neu olau fel y ffynhonnell golau, ac mae ei donfedd tua 0.4 μm. Cydraniad y microsgop yw hanner y donfedd, hynny yw, 0.2 μm, a'r ddelwedd leiaf sy'n weladwy i'r llygad noeth yw 0.2 mm. Felly, gall defnyddio drych olew (trochi) i chwyddo 1000 gwaith chwyddo’r gronynnau 0.2μm yn 0.2mm sy’n weladwy i’r llygad noeth. Gellir defnyddio microsgopau optegol cyffredin ar gyfer arsylwi bacteria, actinomysetau a ffyngau.
2. Defnyddir microsgopeg Darkfield yn gyffredin i arsylwi morffoleg a symudiad microbaidd heb ei staenio. Ar ôl i'r cyddwysydd cae tywyll gael ei osod yn y microsgop cyffredin, ni all y golau dreiddio'n uniongyrchol o'r canol, ac mae'r maes golygfa yn dywyll. Pan fydd y sbesimen yn derbyn golau oblique o ymyl y cyddwysydd, gellir ei wasgaru, felly gellir gweld micro-organebau llachar fel bacteria neu spirochetes yn y cefndir maes tywyll.
3. microsgop cyferbyniad cam Mae microsgop cyferbyniad cam yn defnyddio effaith golau y plât gwahaniaeth cam i newid y cyfnod golau ac osgled golau uniongyrchol, a throsi gwahaniaeth cyfnod golau yn wahaniaeth arddwysedd golau. O dan ficrosgop cyferbyniad cam, pan fydd golau yn mynd trwy sbesimen heb ei staenio, mae'r gwahaniaeth yn y cyfnod golau yn cael ei achosi gan anghysondeb dwysedd gwahanol rannau o'r sbesimen, a gellir arsylwi morffoleg, strwythur mewnol a modd symud micro-organebau.
4. microsgop fflworoleuedd Mae microsgop fflworoleuedd yn y bôn yr un fath â microsgop optegol cyffredin, y prif wahaniaeth yw'r ffynhonnell golau, hidlydd a chyddwysydd. Ar hyn o bryd, mae'r rhan fwyaf ohonynt yn defnyddio dyfeisiau epi-golau, a defnyddir lampau mercwri pwysedd uchel yn gyffredin fel ffynonellau golau, a all allyrru golau uwchfioled neu las-fioled. Mae dau fath o hidlwyr: hidlydd excitation a hidlydd amsugno. Yn ogystal â chyddwysyddion maes llachar cyffredinol, gellir defnyddio cyddwysyddion maes tywyll hefyd mewn microsgopau fflworoleuedd gan ddefnyddio golau glas i wella'r cyferbyniad rhwng fflworoleuedd a chefndir. Mae'r dull hwn yn berthnasol i ganfod neu adnabod bacteria sydd wedi'u staenio â phigmentau fflwroleuol neu wedi'u cyfuno â gwrthgyrff fflwroleuol.
5. Mae microsgopau electron yn defnyddio llif electron fel ffynhonnell golau, ac mae'r donfedd ddegau o filoedd o weithiau'n wahanol i olau gweladwy, sy'n gwella'r datrysiad yn fawr. Mae hefyd yn defnyddio coil magnetig fel system ymhelaethu optegol, a gall y chwyddhad gyrraedd degau o filoedd neu gannoedd o filoedd o weithiau. Fe'i defnyddir yn aml ar gyfer arsylwi gronynnau firws ac uwch-strwythur bacteriol.
Arsylwi sbesimenau microbaidd heb eu staenio:
Yn gyffredinol, gellir defnyddio sbesimenau heb eu staenio i arsylwi morffoleg bacteriol, pŵer a symudiad. Mae bacteria yn ddi-liw ac yn dryloyw pan nad ydynt wedi'u staenio, ac fe'u gwelir o dan ficrosgop yn bennaf gan y gwahaniaeth rhwng mynegai plygiannol y bacteria a'r amgylchedd cyfagos. Mae bacteria gyda flagella yn symud yn egnïol, tra bod bacteria heb flagella yn dangos mudiant Brownian afreolaidd. Mae gan facteria hyfyw fel Treponema pallidum, Leptospira, a Campylobacter siapiau a phatrymau symud nodedig, sydd o arwyddocâd diagnostig. Y dulliau a ddefnyddir yn gyffredin yw dull gollwng pwysau, dull gollwng tlws crog a dull capilari.
1. Gwnewch gais Vaseline o amgylch twll ceugrwm y gwydr ceugrwm glân trwy hongian dull gollwng, defnyddiwch ddolen brechu i gymryd cylch o ataliad bacteriol a'i roi yng nghanol y gwydr clawr, yna alinio twll ceugrwm y gwydr ceugrwm â y gostyngiad yng nghanol y gwydr gorchudd a'i orchuddio, yna trowch ef drosodd yn gyflym, gwasgwch y gwydr gorchudd yn ysgafn i'w wneud yn glynu'n dynn i'r Vaseline ar ymyl y twll ceugrwm, a'i arsylwi o dan ficrosgop chwyddo uchel (neu cae tywyll).
2. Cymerwch gylch o ataliad bacteriol gyda dolen brechu a'i roi yng nghanol sleid gwydr glân trwy ddull gollwng pwysau, a gorchuddiwch yr ataliad bacteriol yn ofalus gyda gwydr gorchudd, gan ofalu i osgoi swigod a gorlif yr ataliad bacteriol . Ar ôl sefyll yn llonydd am ychydig eiliadau, arsylwch o dan ficrosgop pŵer uchel mewn cae llachar (neu faes tywyll).
3. Defnyddir y dull capilari yn bennaf ar gyfer archwilio cineteg bacteria anaerobig. Fel arfer dewiswch 60~70mm o hyd. Ar ôl seiffno'r hongiad bacteria anaerobig trwy gapilari ag agorfa o 0.5-1.0 mm, seliwch ddau ben y capilari â fflam. Gosodwyd y capilari ar y sleid wydr gyda phapur plastig, a'i arsylwi o dan lens pŵer uchel mewn maes tywyll.
Arsylwi sbesimenau microbaidd lliw gyda microsgop:
Ar ôl i'r sbesimen bacteriol gael ei staenio, oherwydd y cyferbyniad sydyn mewn lliw rhwng y bacteria a'r amgylchedd cyfagos, nodweddion morffolegol y bacteria (megis maint, siâp, trefniant, ac ati) y bacteria a rhai strwythurau arbennig (fel fel capsiwlau, flagella, sborau, ac ati) gellir eu harsylwi'n glir o dan ficrosgop optegol cyffredin, a gellir dosbarthu a nodi'r bacteria yn ôl yr adweithedd staenio.
(1) Gweithdrefn gyffredinol staenio bacteriol Y weithdrefn gyffredinol ar gyfer staenio bacteriol yw: ceg y groth (sychu) - gosod - staenio.
1. Ceg y groth Paratoi gwaed, secretiadau, ysgarthiadau, hylif tyllu a diwylliant hylif, a taenu ffilm tenau uniongyrchol ar sleidiau gwydr; awtopsi neu feinweoedd anifeiliaid heintiedig, taenwch y briw gyda swab cotwm ar gyfer samplu. Ar gyfer paratoi cytrefi bacteriol neu lawntiau ar gyfrwng solet, defnyddiwch ddolen frechu yn gyntaf i gymryd cylch o halwynog arferol a'i roi yng nghanol y sleid wydr, yna defnyddiwch ddolen brechu di-haint i gymryd ychydig o ddiwylliant a malu. mae'n gyfartal mewn saline arferol, ei wasgaru i arwyneb gorchuddio 1cm2, a gadewch iddo sychu'n naturiol ar dymheredd yr ystafell neu sychu'n araf o bell.
2. Pwrpas y gosodiad yw lladd bacteria, ceulo protein bacteriol a strwythur, a hwyluso staenio; hyrwyddo bacteria i gadw at y sleid er mwyn osgoi cael eu golchi i ffwrdd gan ddŵr wrth olchi; newid athreiddedd bacteria i liwiau, sy'n fuddiol i staenio strwythurau mewngellol bacteriol. Fel arfer caiff ei osod trwy wresogi gyda fflam, ac mae'r ceg y groth sych yn cael ei basio'n gyflym drwy'r fflam am 3 gwaith. Mae'n well peidio â llosgi'r croen ar gefn y llaw pan fydd yn cyffwrdd â'r sleid.
3. Lliwio Yn ôl gwahanol ddibenion arolygu, dewiswch wahanol ddulliau lliwio ar gyfer lliwio. Wrth liwio, ychwanegwch y toddiant llifyn yn ôl y galw i gynyddu'r gorchudd.
4. Mordant Gelwir unrhyw sylwedd a all wella'r affinedd rhwng y llifyn a'r gwrthrych wedi'i liwio, gosod y llifyn ar y gwrthrych wedi'i liwio ac achosi newid yn athreiddedd y gellbilen yn mordant. Defnyddir alum, asid tannig, halwynau metel ac ïodin, ac ati, a defnyddir gwresogi hefyd i hyrwyddo lliwio. Gellir defnyddio mordants rhwng staenio cynradd a gwrth-staenio, a gellir eu defnyddio hefyd ar ôl gosod neu eu cynnwys mewn sefydlogi a staenio.
5. Decolorization Gelwir unrhyw asiant cemegol sy'n gallu tynnu lliw y gwrthrych lliwio yn decolorizer. Defnyddir ethanol, aseton, ac ati yn gyffredin fel decolorizers. Gall yr asiant dad-liwio ganfod graddau sefydlogrwydd y cyfuniad o facteria a llifynnau, y gellir eu defnyddio ar gyfer staenio gwahaniaethol.
6. Gwrth-staenio Mae bacteria neu eu strwythurau sydd wedi'u dadliwio yn aml yn cael eu gwrth-staenio â datrysiad gwrth-staen er mwyn ei arsylwi'n hawdd. Mae lliw yr hydoddiant gwrth-staenio yn wahanol i liw'r hydoddiant lliwio cynradd i ffurfio cyferbyniad sydyn. Ni ddylai'r gwrth-staenio fod yn rhy gryf, er mwyn peidio â chuddio lliw y staenio cychwynnol.
