Cyflwyniad i rywfaint o wybodaeth am ficrosgop optegol
Offeryn neu ddyfais sy'n chwyddo gwrthrych bach neu ran fach iawn o wrthrych ar chwyddhad uchel ar gyfer arsylwi. Fe'i defnyddir yn eang mewn cynhyrchu diwydiannol ac amaethyddol ac ymchwil wyddonol. Mae biolegwyr a gweithwyr meddygol hefyd yn defnyddio microsgopau llawer yn eu busnes. Wedi'i rannu'n fras yn ficrosgopau optegol a microsgopau electron.
Microsgop optegol yw microsgop sy'n defnyddio golau gweladwy fel ffynhonnell golau. Gellir rhannu microsgopau optegol cyffredin yn ddwy ran: y system optegol a'r ddyfais fecanyddol. Mae'r system optegol yn bennaf yn cynnwys sylladuron, lensys gwrthrychol, cyddwysyddion, diafframau a ffynonellau golau. Mae'r ddyfais fecanyddol yn bennaf yn cynnwys y gasgen lens, colofn drych, llwyfan, sylfaen drych, sgriw addasu trwch a rhannau eraill (Ffigur 1). Dangosir ei egwyddor optegol sylfaenol yn Ffigur 2. Mae'r lens convex bach ar y chwith yn y ffigwr yn cynrychioli grŵp o lensys gyda hyd ffocal byr, a elwir yn lens gwrthrychol. Mae'r lens amgrwm mawr ar y dde yn cynrychioli grŵp o lensys â hyd ffocal hir, a elwir yn sylladur. Mae'r gwrthrych i'w arsylwi (AB) wedi'i osod ychydig y tu allan i ganolbwynt (f1) y lens gwrthrychol. Mae'r golau o'r gwrthrych yn ffurfio delwedd real chwyddedig gwrthdro (B'A') ychydig y tu mewn i ffocws y sylladur (f2) ar ôl pasio drwy'r lens gwrthrychol. Mae llygaid yr arsylwr yn chwyddo ymhellach y ddelwedd go iawn (B'A') yn ddelwedd rithwir wrthdro (B"A") trwy'r sylladur.
Mae'r sylladur wedi'i leoli uwchben y gasgen microsgop ac yn gyffredinol mae'n cynnwys dwy lens amgrwm. Yn ogystal ag ehangu ymhellach y ddelwedd wirioneddol a ffurfiwyd gan y lens gwrthrychol, mae hefyd yn cyfyngu ar y maes golygfa a welir gan y llygaid. Yn ôl y chwyddiad, mae yna dri math o lygadau a ddefnyddir yn gyffredin: 5 gwaith, 10 gwaith a 15 gwaith.
Yn gyffredinol, mae'r lens gwrthrychol wedi'i leoli o dan y gasgen microsgop, yn agos at y gwrthrych sy'n cael ei arsylwi. Mae'n cynnwys 8 i 10 lensys. Ei swyddogaeth yw ehangu (creu delwedd wirioneddol chwyddedig ar gyfer y gwrthrych), yr ail yw sicrhau ansawdd y ddelwedd, a'r trydydd yw cynyddu'r datrysiad. Gellir rhannu lensys gwrthrychol a ddefnyddir yn gyffredin yn chwyddhad isel (4 ×), chwyddo canolig (10 × neu 20 ×), chwyddhad uchel (40 ×) a lens gwrthrychol trochi olew (100 ×) yn ôl y chwyddhad. Mae lensys gwrthrychol lluosog wedi'u gosod ar yr olwyn newidiwr drych, a gellir dewis y lens gwrthrychol â lluosrifau gwahanol trwy gylchdroi'r trofwrdd yn ôl yr angen.
Chwyddiad y microsgop yw lluosrif y sylladur wedi'i luosi â'r amcan. Er enghraifft, os yw'r sylladur yn 10 gwaith a'r lens gwrthrychol yn 40 gwaith, mae'r chwyddhad yn 40 × 10 gwaith (chwyddiad 400 gwaith). Gall microsgop da chwyddo 2000 o weithiau a gall wahaniaethu rhwng dau bwynt 1 ×{{{}}cm oddi wrth ei gilydd.
Pan fydd golau gwyn yn mynd trwy'r lens amgrwm, mae gan y golau â thonfedd fyrrach (glas-porffor) blygiant mwy na'r golau â thonfedd hir (coch-oren). Felly, wrth ddelweddu, mae sbectrwm amrywiol o amgylch y ddelwedd, ac mae cylch o olau glas neu goch. Gelwir y diffyg lliw hwn yn aberration cromatig. Oherwydd y gwahanol onglau y mae golau yn mynd i mewn (ac yn gadael) y gwahanol rannau o arwyneb y lens, mae'r golau sy'n pasio trwy ymyl y lens yn cael ei blygu ar ongl fwy na'r golau sy'n mynd trwy ganol y lens. Felly, mae delweddau aneglur ac ystumiedig yn ymddangos o amgylch cylchedd y ddelwedd yn ystod delweddu. Gelwir y diffyg hwn o ddelweddu crymedd arwyneb yn aberration sfferig. Mae cyfres o grwpiau lens amgrwm a cheugrwm gyda gwahanol siapiau, strwythurau a phellteroedd yn cydweithio â'i gilydd i gywiro aberiad cromatig ac aberiad sfferig i'r graddau mwyaf, gan ffurfio delwedd ddisglair, glir a chywir. Dyna pam mae'r sylladur neu'r lens gwrthrychol yn cynnwys set o lensys yn y drefn honno. Gelwir lensys o'r fath yn achromats cynllun.
Pan ragamcanir golau o un cyfrwng (fel aer) i gyfrwng dwysach arall (fel gwydr), bydd yn plygu i'r "llinell arferol" (llinell berpendicwlar i ryngwyneb y cyfrwng), fel y llinell BOA yn Ffigur 3. Pan fydd golau yn mynd i mewn o gyfrwng trwchus (gwydr) i gyfrwng nad yw'n drwchus (aer), bydd yn gwyro oddi wrth y "llinell arferol", megis y llinell AOB (Ffigur 3a). Pan fydd y golau'n mynd trwy'r gwydr cyddwysydd (mynegai plygiannol 1.51) ac yn mynd i mewn i'r aer, bydd hefyd yn gwyro ac yn plygu tuag allan, felly mae maint y golau sy'n mynd i mewn i'r lens gwrthrychol yn cael ei leihau'n fawr, ac mae datrysiad y ddelwedd hefyd yn cael ei leihau. Wrth ddefnyddio lens gwrthrychol 100x, os yw olew wedi'i lenwi rhwng y lens gwrthrychol a'r gwydr gorchudd (mae'r mynegai plygiant hefyd yn 1.51) i ynysu'r aer, gall y golau fynd i mewn i'r lens gwrthrychol bron heb blygiant, sy'n cynyddu disgleirdeb a datrysiad y ddelwedd. Gelwir amcanion o'r fath yn amcanion trochi olew (Ffigur 3b).
Mae'r cyddwysydd wedi'i leoli o dan y cam microsgop, a all gydgyfeirio'r golau o'r ffynhonnell golau, canolbwyntio'r golau ar y sbesimen, a gwneud y sbesimen wedi'i arbelydru'n gyfartal â dwyster golau cymedrol. Mae pen isaf y cyddwysydd wedi'i gyfarparu â stop agorfa (diaffram) i reoli trwch y trawst.
Mae ffynhonnell goleuo microsgop optegol cyffredin wedi'i lleoli o dan y cyddwysydd, sef bwlb golau cryf arbennig gyda goleuo unffurf, ac mae ganddo wrthydd newidiol i newid dwyster y golau.
Gan fod golau ffynhonnell golau microsgop optegol cyffredin yn trosglwyddo o waelod corff y lens, yn mynd trwy'r lens cyddwysydd, y lens gwrthrychol, ac yn cyrraedd y sylladur, rhaid torri'r sampl i'w arsylwi yn dafelli tenau gyda thrwch o tua 6 μm sy'n gallu trosglwyddo golau mewn ymchwil feddygol a biolegol. Ac i staenio i ddangos meinweoedd a chelloedd gwahanol a strwythurau mân eraill. Gelwir y broses brosesu gyfan yn dechneg sleisys meinwe confensiynol, gan gynnwys dewis deunyddiau meinwe priodol, eu gosod â hydoddiant fformaldehyd (formalin), dadhydradu ag alcohol gam wrth gam, mewnosod mewn paraffin, torri'r meinwe yn dafelli tenau gyda microtome a'u gosod. ar sleidiau gwydr, ac yna Ar ôl staenio â lliw hematoxylin-eosin, gosodwyd y sleidiau meinwe o'r diwedd mewn glud resin optegol. Gellir storio sleidiau meinwe parod am amser hir.
Mae sylladur a lens gwrthrychol y microsgop yn cael eu gosod ar ddau ben y gasgen lens, ac mae eu pellter yn sefydlog. Rhowch y sleid meinwe ar y llwyfan, a chylchdroi'r sgriw addasu bras i ddod â'r llwyfan yn agos at y lens gwrthrychol. Mae'r sleisen feinwe'n mynd i mewn i blân ffocal y lens gwrthrychol, a gellir gweld y ddelwedd feinwe yn y sbesimen yn y sylladur. Yna defnyddiwch y sgriw addasu mân i wneud y ddelwedd yn y sylladur yn glir i'w arsylwi. Wrth newid y chwyddhad, rhaid disodli'r sylladur neu'r lens gwrthrychol.
