Paratoi ac arsylwi samplau biolegol ar gyfer microsgopeg electron
Mae cydraniad microsgop yn dibynnu ar donfedd y golau a ddefnyddir. Mae'r microsgop electron, a ddechreuodd ymddangos ym 1933, yn defnyddio pelydr electron gyda thonfedd llawer byrrach na golau gweladwy fel ffynhonnell golau, fel bod y cydraniad y gall ei gyflawni wedi'i wella'n fawr o'i gymharu â microsgop optegol. Mae'r gwahaniaeth mewn ffynonellau golau hefyd yn pennu cyfres o wahaniaethau rhwng microsgopau electron a microsgopau optegol.
Yn ôl y gwahaniaethau yn egwyddorion delweddu pelydr electron a'r gwahanol ffyrdd o weithredu ar samplau, mae microsgopau electron modern wedi datblygu i fod yn sawl math. Ar hyn o bryd, y rhai a ddefnyddir amlaf yw microsgopau electron trawsyrru a microsgopau electron sganio. Gall cyfanswm chwyddhad y cyntaf fod rhwng 1000-1000000. Gall cyfanswm chwyddo'r olaf amrywio rhwng 20 a 300,000 o weithiau. Mae'r arbrawf hwn yn bennaf yn cyflwyno paratoi dau fath o samplau microsgop, microsgop electron trawsyrru a microsgop electron sganio.
2. Offer
1. Bacteria Escherichia coli (Escherichia coli) gogwydd.
2. Hydoddiant neu adweithydd asetad amyl, asid sylffwrig crynodedig, ethanol absoliwt, dŵr di-haint, 2% ffosffotungstate sodiwm (pH 6.5-8.{4}}) hydoddiant dyfrllyd, 0.3% polyethylen fformaldehyd (hydawdd mewn clorofform) hydoddiant, celloedd Pigment c, amoniwm asetad, plasmid pBR322.
3. Offerynnau neu offer eraill: microsgop optegol cyffredin, rhwyll copr, twndis porslen, bicer, dysgl, dropper di-haint, tweezers di-haint, pinnau, sleidiau, bwrdd cyfrif, peiriant cotio gwactod, sychwr pwynt critigol, ac ati.
3. Camau gweithredu
(1) Paratoi sampl ac arsylwi ar gyfer microsgopeg electron trawsyrru
1. Trin rhwyll metel
Rhoddir y sampl ar gyfer microsgopeg optegol ar sleid wydr i'w arsylwi. Fodd bynnag, mewn microsgopeg electronau trawsyrru, gan na all electronau dreiddio i'r daflen wydr, dim ond fel cludwyr y gellir defnyddio deunyddiau rhwyll, a elwir fel arfer yn rhwydi cludo. Gellir rhannu'r rhwyll cludwr yn nifer o wahanol fanylebau oherwydd gwahanol ddeunyddiau a siapiau, ymhlith y rhai a ddefnyddir amlaf yw rhwyll copr 200-400 (nifer y tyllau). Rhaid trin y rhwyll copr cyn ei ddefnyddio i gael gwared ar faw a'i gadw'n lân, fel arall bydd yn effeithio ar ansawdd y ffilm gynhaliol ac eglurder y lluniau enghreifftiol. Mae'r arbrawf hwn yn defnyddio rhwyll gopr 400-, y gellir ei drin fel a ganlyn: yn gyntaf, ei socian a'i gannu ag amyl asetad am sawl awr, yna ei rinsiwch â dŵr distyll sawl gwaith, ac yna ei socian mewn ethanol absoliwt ar gyfer dadhydradu. Os nad yw'r rhwyll gopr yn lân o hyd ar ôl y dulliau uchod, gallwch ei socian mewn asid sylffwrig crynodedig gwanedig (1: 1) am 1 i 2 funud, neu ei ferwi mewn hydoddiant 1% NaOH am ychydig funudau, ei rinsio â distyll. dŵr sawl gwaith, ac yna ei roi mewn anhydrus Dehydrate mewn ethanol a'i roi o'r neilltu.
2. Paratoi bilen cymorth
Wrth arsylwi samplau, dylai'r rhwyd cludwr hefyd gael ei orchuddio â haen o ffilm anstrwythuredig, unffurf, fel arall bydd samplau bach yn gollwng o dyllau'r rhwyd cludwr. Gelwir y ffilm hon fel arfer yn ffilm gynhaliol neu ffilm cludwr. Dylai'r ffilm gynhaliol fod yn dryloyw electron, a dylai ei drwch fod yn llai na 20nm yn gyffredinol; o dan effaith y trawst electron, dylai'r ffilm hefyd fod â chryfder mecanyddol penodol i gynnal sefydlogrwydd strwythurol a chael dargludedd thermol da; yn ogystal, dylid defnyddio'r rhwydwaith cymorth mewn microsgopeg electron Ni ddylai fod unrhyw strwythur gweladwy oddi tano, dim adwaith cemegol gyda'r sampl yn cael ei gario, ac ni ddylai unrhyw ymyrraeth ag arsylwi'r sampl. Mae ei drwch yn gyffredinol tua 15nm. Gall y ffilm ategol fod yn ffilm plastig (fel ffilm collodion, ffilm polyethylen fformaldehyd, ac ati), ffilm carbon neu ffilm fetel (fel ffilm beryllium, ac ati). O dan amodau gwaith arferol, gall ffilm plastig fodloni'r gofynion. Ymhlith ffilmiau plastig, mae ffilm collodion yn gymharol hawdd i'w baratoi, ond nid yw ei gryfder cystal â ffilm fformaldehyd polyethylen.
