Paratoi ac arsylwi samplau biolegol ar gyfer microsgopeg electron
Mae cydraniad y microsgop yn dibynnu ar donfedd y golau a ddefnyddir, dechreuodd y microsgop electron ymddangos ym 1933 oherwydd y defnydd o donfedd llawer byrrach na golau gweladwy y trawst electron fel ffynhonnell golau, fel bod y datrysiad. yn gallu cyflawni na'r microsgop optegol gwella'n fawr. Mae'r ffynhonnell golau gwahanol hefyd yn pennu cyfres o wahaniaethau rhwng y microsgop electron a'r microsgop optegol.
Yn ôl y gwahaniaethau yn egwyddor delweddu y trawst electron a rôl y sampl ar y gwahanol ffyrdd, mae'r microsgop electron modern wedi'i ddatblygu i ffurfio nifer o fathau, ar hyn o bryd * a ddefnyddir yn gyffredin yw'r microsgop electron trawsyrru ac electron sganio microsgop, gall y cyntaf fod yn yr ystod o 1,000-1,000,000 gwaith cyfanswm chwyddo'r ystod o newidiadau, gall yr olaf fod yng nghyfanswm chwyddhad y { {4}},000 gwaith cyfanswm y chwyddhad o'r newidiadau rhwng. Mae'r arbrawf hwn yn canolbwyntio ar baratoi samplau ar gyfer y ddau fath o ficrosgop, sef microsgop electron trawsyrru a microsgop electron sganio.
Defnyddiau
1. Straen Escherichia coli (Escherichia coli, Escherichia coli) gogwydd.
2. Toddiannau neu adweithyddion Amyl asetad, asid sylffwrig crynodedig, ethanol anhydrus, dŵr di-haint, 2% sodiwm asid ffosffotungstic (pH 6.5-8.{4}}) hydoddiant dyfrllyd, 0.3% fformaldehyd polyvinyl (hydoddi mewn trichloromethane) hydoddiant, cytochrome c, amoniwm asetad, plasmid pBR322.
3. Offerynnau neu baraffernalia eraill Microsgop optegol cyffredin, rhwyll copr, twndis porslen, bicer, dysgl fflat, bwred di-haint, pliciwr di-haint, lancet, sleidiau, ** plât cyfrif, gorchudd gwactod, sychwr pwynt critigol ac ati.
Camau gweithredu
(I) Paratoi sampl ac arsylwi microsgopeg electronau trawsyrru
1. Trin rhwyll metel
Rhoddir samplau ar gyfer microsgopeg optegol ar sleidiau i'w harsylwi. Fodd bynnag, mewn microsgopeg electronau trawsyrru, gan na all electronau dreiddio i'r ddalen wydr, dim ond deunydd rhwyll y gellir ei ddefnyddio fel cludwr, a elwir fel arfer yn rwyll cludwr. Gellir rhannu'r rhwyll cludwr yn nifer o wahanol fanylebau oherwydd gwahanol ddeunyddiau a siapiau, a'r * a ddefnyddir yn gyffredin yw'r rhwyll 200-400 (nifer y tyllau) rhwyll copr. Dylid trin rhwyll copr cyn ei ddefnyddio i gael gwared ar y baw arno a'i gadw'n lân, fel arall bydd yn effeithio ar ansawdd y ffilm ategol ac eglurder y lluniau enghreifftiol. Y rhwyll gopr a ddefnyddir yn yr arbrawf hwn yw 400 rhwyll, y gellir ei drin yn y ffordd ganlynol: yn gyntaf, cannwch ef ag asetad amyl am ychydig oriau, yna rinsiwch ef â dŵr distyll am sawl gwaith, ac yna ei gannu mewn ethanol anhydrus ar gyfer dadhydradu. Os nad yw'r rhwyll copr trwy'r dull uchod yn lân o hyd, gellir ei ddefnyddio i wanhau asid sylffwrig crynodedig (1: 1) wedi'i drochi mewn 1 ~ 2 funud, neu mewn toddiant NaOH 1% wedi'i ferwi am sawl munud, ei rinsio sawl gwaith â dŵr distyll. , wedi'i osod mewn dadhydradiad ethanol anhydrus, i'w ddefnyddio.
2. Paratoi ffilm cymorth
Yn yr arsylwi sampl, yn y rhwydwaith cludwr dylai hefyd gael ei orchuddio â haen o ffilm anstrwythuredig, unffurf, fel arall bydd samplau bach yn gollwng allan o'r tyllau yn y rhwydwaith cludwr, fel arfer gelwir yr haen hon o ffilm yn ffilm gynhaliol neu ffilm cludwr. Dylai'r ffilm gynhaliol fod yn dryloyw i electronau, a dylai ei drwch fod yn llai na 20nm yn gyffredinol; o dan effaith y trawst electron, dylai'r ffilm hefyd fod â rhywfaint o gryfder mecanyddol, gall gynnal sefydlogrwydd y strwythur, ac mae ganddi ddargludedd thermol da; yn ogystal, ni ddylai'r rhwydwaith cymorth fod â strwythur gweladwy o dan y microsgop electron, ac nid oes ganddo adwaith cemegol gyda'r sampl a gludir, ac nid yw'n ymyrryd ag arsylwi'r sampl, ac mae ei drwch yn gyffredinol tua 15nm. Gellir gwneud y ffilm gynhaliol o ffilm plastig (ee ffilm cotwm tân, ffilm fformaldehyd polyethylen, ac ati), ffilm carbon neu ffilm fetel (ee ffilm beryllium, ac ati). O dan amodau gwaith arferol, gellir bodloni'r gofynion gyda ffilm plastig, tra bod paratoi'r ffilm plastig yn y ffilm gludiog cotwm tân yn gymharol hawdd, ond nid yw'r cryfder mor gryf â ffilm fformaldehyd polyethylen.
