Gofynion ar gyfer paratoi samplau arferol ar gyfer microsgopeg
Mae microsgop confocal yn gynnyrch newydd uwch-dechnoleg a ddatblygwyd yn yr 1980au, ac mae'n un o'r offerynnau dadansoddol pwysig mewn bioleg foleciwlaidd a gwyddor bywyd heddiw. Mae microsgopeg confocal yn seiliedig ar ddelweddu microsgop fflworoleuedd gyda dyfais sganio laser wedi'i hychwanegu, gan ddefnyddio cyfrifiadur ar gyfer prosesu delweddau i gael delweddau fflwroleuol o'r microstrwythur y tu mewn i gelloedd neu feinweoedd, ac i arsylwi newidiadau ym morffoleg llawer o beiriannau signal ffisiolegol ar y lefel isgellog. Dewch yn offeryn ymchwil pwerus ym meysydd morffoleg, bioleg celloedd moleciwlaidd, niwrowyddoniaeth, ffarmacoleg, geneteg a meysydd gwyddonol eraill.
Mae paratoi sampl ar gyfer microsgopeg confocal yn gam hollbwysig cyn ei ganfod. Mae angen labelu samplau gyda stilwyr fflwroleuol (sengl, dwbl, triphlyg).
yr
Gall sbesimenau fod yn feinwe sefydlog neu fyw, neu'n ddiwylliannau ymlynol sefydlog neu fyw. Dylid meithrin celloedd ar seigiau meithriniad bach arbennig Confocal neu ar slipiau gorchuddio. Gorchuddiwch gelloedd, ysgwyd neu ollwng sleisys, a'u gorchuddio â gorchuddion gorchuddio â gorchuddion. Mae trwch Zda y sampl tua 1 ~ 2mm, dylai trwch y gwydr gorchudd a ddefnyddir fod yn llai na 0.17mm, a dylai trwch y gwydr sleidiau fod rhwng 0.8 ~ 1.2 mm, ac mae'r wyneb yn llyfn, mae'r trwch yn unffurf, ac nid oes fflworoleuedd ymyrraeth amlwg. Defnyddir cyfrwng mowntio yn aml ar gyfer samplau sefydlog, a defnyddir glyserol a baratowyd yn PBS gyda pH o 8.5-9 yn gyffredin ar gyfer mowntio.
Gofynion paratoi sampl arferol:
1. Detholiad o liwiau
Gan fod y microsgop confocal yn defnyddio laser un tonfedd fel ffynhonnell golau, dylai'r dewis o liwiau fflwroleuol fod yn seiliedig ar donfedd y laser sydd â'r microsgop cydffocal. Os oes llifynnau fflwroleuol lluosog yn yr un sampl, dylid hefyd ystyried eu tonfedd allyriadau cymaint â phosibl. Peidiwch â gorgyffwrdd i osgoi problemau traws-liw.
2. Dewis cludwr sampl
Yn gyffredinol, mae lens gwrthrychol pŵer uchel microsgop confocal yn lens olew, mae ei agorfa rifiadol yn fach, ac mae'n ofynnol i'r pellter gweithio rhwng y lens a'r sampl fod yn ddim mwy na 0.17mm. Mae sleidiau a gorchuddion yn iawn. Os yw'n gelloedd crog neu ronynnau crog, gellir defnyddio dysgl petri wedi'i neilltuo ar gyfer microsgop cydffocal i gario'r sampl i'w arsylwi.
3. Dewis cyfrwng mowntio
Os mai dim ond unwaith y mae angen arsylwi'r sampl ac nad yw'n hawdd diffodd y fflworoleuedd, gallwch ddewis crynodiad penodol o gymysgedd glyserol i selio'r sleid. Os oes angen gosod y sampl am gyfnod o amser a'i gymryd sawl gwaith, dylid dewis cyfrwng mowntio gwrth-fflworoleuedd i leihau colli signalau fflwroleuol.
