Y gwahaniaeth rhwng microsgop confocal laser a microsgop optegol traddodiadol
Mae Microsgopeg Fflworoleuedd Cydffocal Sganio Laser yn offeryn dadansoddi bioleg moleciwlaidd a chelloedd cymharol ddatblygedig sy'n defnyddio technoleg gyfrifiadurol, laser a phrosesu delweddau i gael data tri dimensiwn o samplau biolegol. Fe'i defnyddir yn bennaf i arsylwi ar strwythur celloedd byw a newidiadau biolegol moleciwlau ac ïonau penodol, dadansoddiad meintiol, a phenderfyniad meintiol amser real.
Egwyddor microsgopeg confocal laser: defnyddiwch y twll pin goleuo sydd wedi'i osod y tu ôl i'r ffynhonnell golau a'r twll pin canfod a osodir o flaen y synhwyrydd i wireddu goleuo pwynt a chanfod pwynt. Mae'r golau a allyrrir o'r ffynhonnell golau trwy'r twll pin goleuo yn canolbwyntio ar bwynt ar awyren ffocal y sampl, ac mae'r fflworoleuedd a allyrrir o'r pwynt hwn yn cael ei ddelweddu ar y twll pin canfod, ac mae unrhyw olau a allyrrir y tu allan i'r pwynt hwn yn cael ei rwystro gan y canfod. twll pin. Mae'r twll pin goleuo a'r twll pin canfod yn cyd-fynd â'r pwynt arbelydru neu'r pwynt a ganfuwyd, felly'r pwynt a ganfyddir yw'r pwynt cydffocal, a'r awyren lle mae'r pwynt a ganfuwyd yw'r awyren confocal.
Mae'r cyfrifiadur yn dangos y pwyntiau a ganfuwyd ar sgrin y cyfrifiadur ar ffurf pwyntiau delwedd. Er mwyn cynhyrchu delwedd gyflawn, mae'r system sganio yn y llwybr optegol yn sganio ar awyren ffocal y sampl i gynhyrchu delwedd gydffocal gyflawn. Cyn belled â bod y llwyfan yn symud i fyny ac i lawr ar hyd yr echelin Z, mae haen newydd o'r sampl yn cael ei symud i'r awyren confocal, ac mae haen newydd y sampl yn cael ei ddelweddu ar y monitor. Gyda symudiad parhaus yr echel Z, gellir cael delweddau parhaus o wahanol haenau o'r sampl. Delwedd wedi'i dorri'n ysgafn.
Y Gwahaniaeth Rhwng Microsgopau Golau Traddodiadol
Mae gan ficrosgopau fflworoleuedd traddodiadol ddiffyg anorchfygol: mae'r strwythurau fflwroleuol y tu allan i'r awyren ffocal yn aneglur ac yn aneglur. Y rheswm yw bod gan y rhan fwyaf o sbesimenau biolegol strwythurau sy'n gorgyffwrdd. Os yw'r strwythurau wedi'u labelu'n fflwroleuol yn cael eu dosbarthu ar wahanol lefelau ac yn gorgyffwrdd, mae'r fflworoleuedd gwasgaredig o uwchben neu islaw'r awyren ffocal hefyd yn cael ei dderbyn gan y lens gwrthrychol, a bydd datrysiad y microsgop fflworoleuedd yn cael ei wella'n fawr. lleihau.
Ar sail microsgopau optegol traddodiadol, mae microsgopau confocal sganio laser yn defnyddio golau laser fel y ffynhonnell golau, yn mabwysiadu'r egwyddor a'r ddyfais o ganolbwyntio cyfun, ac yn defnyddio cyfrifiaduron i berfformio prosesu delweddau digidol, arsylwi, dadansoddi ac allbwn y gwrthrychau a arsylwyd. Gellir sganio'r sampl yn domograffig a'i ddelweddu ar gyfer arsylwi annistrywiol a dadansoddi strwythur gofodol tri dimensiwn celloedd. Ar yr un pryd, gan ddefnyddio labelu immunofluorescent a chwiliedyddion labelu fflwroleuol ïon, gall y dechnoleg hon nid yn unig arsylwi celloedd sefydlog a adrannau meinwe, ond hefyd arsylwi a chanfod strwythur deinamig amser real a chanfod strwythur, moleciwlau, ïonau a gweithgareddau bywyd celloedd byw, ar y lefel isgellog Mae arsylwi signalau ffisiolegol fel Ca2 plus , gwerth pH, potensial pilen a newidiadau mewn morffoleg celloedd, wedi dod yn genhedlaeth newydd o offer ymchwil pwerus ym meysydd morffoleg, bioleg celloedd moleciwlaidd, niwrowyddoniaeth, ffarmacoleg, a geneteg.
