Pennu poblogaeth ficrobaidd - dull cyfrif microsgopig uniongyrchol!
I. Gofyniadau Dyben
1, Er mwyn egluro'r egwyddor o gyfrif plât hematocrit.
2, Meistroli'r dull o gyfrif microbaidd gan ddefnyddio plât hematocrit.
II. Egwyddorion sylfaenol
Mae dull cyfrif uniongyrchol microsgop yn swm bach o ataliad y sampl i'w brofi ar sleid arbennig gydag ardal a chyfaint diffiniedig (a elwir hefyd yn y cownter bacteriolegol), yn y microsgop yn cyfrif yn uniongyrchol dull syml, cyflym, sythweledol. Ar hyn o bryd, cownteri bacteriolegol domestig a thramor a ddefnyddir yn gyffredin yw: plât cyfrif celloedd gwaed, cownteri bacteriolegol Peteroff-Hauser a chownteri bacteriolegol Hawksley, ac ati, y gellir eu defnyddio ar gyfer burum, bacteria, sborau llwydni ac ataliadau eraill o gyfrif, yr egwyddor sylfaenol yr un peth. Cyfanswm cyfaint y ddau fath olaf o rifydd yw 0.02mm3 ar ôl rhoi'r slip gorchuddio, a dim ond 0.02mm yw'r pellter rhwng y slip gorchuddio a'r sleisen gario, felly mae celloedd llai fel gellir arsylwi a chyfrif bacteria gydag amcan trochi olew. Yn ogystal â defnyddio'r cownteri hyn, mae yna hefyd ddull amcangyfrif o'r gymhareb o arwynebedd ceg y groth i'r maes golygfa a welir yn uniongyrchol o dan y microsgop, a ddefnyddir yn gyffredinol ar gyfer archwiliad bacteriolegol o laeth buwch. Mae manteision y dull cyfrif microsgop uniongyrchol yn reddfol, yn gyflym ac yn hawdd i'w gweithredu. Fodd bynnag, anfantais y dull hwn yw mai'r canlyniad fel arfer yw swm yr organebau marw a byw. Mae yna rai dulliau i oresgyn yr anfantais hon, megis y cyfuniad o ddiwylliant microsiamber staen bacteria byw (amser byr) ac ychwanegu atalyddion cytokinesis i gyflawni pwrpas cyfrif organebau byw yn unig.
Camau gweithredu
1, Paratoi ataliad bacteriol
Defnyddiwch halwynog di-haint i wneud ataliad bacteriol o furum bragwr gyda chrynodiad priodol.
2, Siambr gyfrif drych
Cyn ychwanegu samplau, dylid archwilio siambr gyfrif y plât cyfrif yn gyntaf. Os oes unrhyw faw, mae angen ei lanhau a'i chwythu'n sych cyn ei gyfrif.
3, Ychwanegu samplau
Plât cyfrif celloedd gwaed glân a sych wedi'i orchuddio â gorchuddion, ac yna defnyddiwch fwred capilari di-haint i ysgwyd ataliad burum y bragwr o ymyl y gorchuddion i ollwng gostyngiad bach, fel bod yr hylif bacteriol ar hyd y bwlch trwy dreiddiad capilari i mewn i'r siambr gyfrif yn awtomatig, yn gyffredinol gellir llenwi siambr gyfrif â hylif bacteriol. Wrth gymryd samplau, dylid ysgwyd yr ateb bacteriol yn dda yn gyntaf; wrth ychwanegu samplau, ni ddylai'r siambr gyfrif fod â swigod aer.
4, cyfrif microsgop
Ar ôl ychwanegu'r sampl, gadewch iddo orffwys am 5 munud, yna rhowch y plât cyfrif celloedd gwaed ar y cam cludwr microsgop, yn gyntaf darganfyddwch leoliad y siambr gyfrif gyda chwyddhad isel, ac yna ei newid i chwyddhad uchel ar gyfer cyfrif. Addaswch ddwysedd golau'r microsgop yn briodol, ar gyfer y microsgop gyda golau adlewyrchydd hefyd dylai roi sylw i'r golau ni ddylai fod yn rhagfarnllyd i un ochr, fel arall nid yw'r maes golygfa yn hawdd i'w tafod yn glir cyfrif llinell grid siambr, neu dim ond gweld y llinell fertigol neu dim ond gweld y llinell lorweddol. Os canfyddir bod yr hylif bacteriol yn rhy drwchus neu'n rhy denau cyn ei gyfrif, mae angen ail-addasu'r gwanhau cyn cyfrif. Gofynion gwanhau sampl cyffredinol o tua 5 i 10 bacteria ym mhob cell yn briodol. Ar gyfer pob siambr gyfrif, mae'r organebau mewn 5 adran ganol (4 cornel ac un adran ganol yn y canol) yn cael eu dewis ar gyfer eu cyfrif. Mae'r organebau sydd wedi'u lleoli ar y llinellau grid fel arfer yn cael eu cyfrif ar y llinellau uchaf a'r dde yn unig. Yn achos egin burum, pan fydd y corff egin yn cyrraedd hanner maint y fam gell, mae'n cael ei gyfrif fel dau organeb. Cyfrif sampl o'r ddwy siambr gyfrif yn y gwerth cyfartalog i gyfrifo cynnwys bacteriol y sampl.
5. Glanhau'r plât hematocrit
Ar ôl ei ddefnyddio, rinsiwch y plât cyfrif celloedd gwaed â dŵr o dan y tap, peidiwch â defnyddio gwrthrychau caled i olchi a brwsio, ei sychu ar eich pen eich hun neu ddefnyddio sychwr gwallt i'w chwythu'n sych ar ôl golchi. Archwiliwch y plât yn ficrosgopig i weld a oes unrhyw organebau gweddilliol neu waddodion eraill ym mhob compartment. Os nad yw'n lân, rhaid ailadrodd y golchi nes ei fod yn lân.
