Gwahaniaethau Rhwng Microsgopau Fflworoleuedd a Microsgopau Golau Cyffredin
Mae microsgopau fflworoleuedd yn wahanol i ficrosgopau optegol confensiynol. Yn hytrach nag arsylwi sbesimenau gyda golau o ffynhonnell golau cyffredin, maent yn defnyddio golau o donfedd penodol (fel arfer golau uwchfioled neu las-fioled) i gyffroi sylweddau fflwroleuol o fewn y sbesimen ar y sleid microsgop, gan achosi sylweddau hyn i allyrru fflworoleuedd. Felly, nid yw ffynhonnell golau microsgop fflworoleuedd yn goleuo'r sbesimen yn uniongyrchol; mae'n gweithredu fel ffynhonnell ynni i gyffroi'r sylweddau fflwroleuol mewndarddol yn y sbesimen. Gallwn weld y sbesimen nid oherwydd goleuo o'r ffynhonnell golau ei hun, ond oherwydd bod y sylweddau fflwroleuol y tu mewn i'r sbesimen yn amsugno'r egni golau excitation ac yna'n allyrru fflworoleuedd.
Mae'n dilyn mai nodwedd allweddol microsgop fflworoleuedd yw y gall ei ffynhonnell golau gyflenwi golau excitation o fand tonfedd penodol, gan alluogi'r sylweddau fflwroleuol yn y sbesimen a arolygwyd i allyrru fflworoleuedd o ddwysedd digonol. Yn y cyfamser, rhaid i ficrosgop fflworoleuedd fod â system hidlo gyfatebol. Mae'n offeryn hanfodol ar gyfer histocemeg fflworoleuedd. Mae microsgop fflworoleuedd yn bennaf yn cynnwys ffynhonnell golau pwysedd uchel iawn, system hidlo (gan gynnwys hidlwyr cyffro a hidlwyr rhwystr), system optegol a system ffotograffig. Mae'n gweithio trwy ddefnyddio golau o donfedd benodol i gyffroi sylweddau fflwroleuol.
① Dulliau Cyffroi Fflworoleuedd Yn ôl ystod tonfedd y golau excitation, mae dau fath: dull excitation UV (dull goleuo uwchfioled) a dull excitation BV (dull goleuo glas-fioled). Mae'r dull excitation UV yn defnyddio golau uwchfioled yn fyrrach na 400 nm ar gyfer excitation. Mae'n cynhyrchu fflworoleuedd anweledig, felly mae'r fflworoleuedd a arsylwyd yn dod o'r sbesimen ei hun. Mae'r dull hwn yn gwahaniaethu'n hawdd rhwng fflworoleuedd penodol ac awtofflworoleuedd y cefndir.
② BV Excitation MethodMae'r dull excitation BV yn defnyddio golau excitation yn amrywio o fioled i las wedi'i ganoli ar 404 nm a 434 nm. Gan fod golau glas yn cael ei ddefnyddio i arbelydru'r sbesimen, mae'n rhaid i'r system hidlo excitation ar gyfer y dull hwn rwystro golau glas yn llwyr a chaniatáu i'r golau gwyrdd a melyn gofynnol basio through.For staenio gwrthgyrff fflwroleuol, mae tonfedd amsugno uchaf y golau excitation yn agos at donfedd allyriadau uchaf y llifyn fflwroleuol. Am y rheswm hwn, rhaid i'r hidlydd a osodwyd ar gyfer cyffro BV ddefnyddio hidlydd rhwystr torri i ffwrdd. Mae'r dull hwn yn defnyddio golau glas ar gyfer cyffro, felly mae'r effeithlonrwydd casglu fflworoleuedd yn gymharol uchel a gellir cael delweddau mwy disglair. Ei anfantais yw na ellir canfod fflworoleuedd uwchlaw 500 nm, a dim ond delweddau melyn-wyrdd y gellir eu gweld uwchlaw 500 nm. Mewn staenio gwrthgyrff fflwroleuol, mae barnu penodoldeb yn dibynnu'n fawr ar wybodaeth lliw, felly gall anfantais y dull cyffroi BV fod yn gyfyngiad mawr wrth drafod penodoldeb cynnil.
