Nodweddion a Chymharu Microsgop Fflworoleuedd a Microsgop Optegol Confensiynol
Mae microsgop fflworoleuedd yn wahanol i ficrosgop optegol arferol. Yn lle goleuo'r sbesimen gyda ffynonellau golau cyffredin, mae'n defnyddio golau tonfedd penodol (fel arfer golau uwchfioled neu las-fioled) i gyffroi sylweddau fflwroleuol o fewn y sbesimen i allyrru fflworoleuedd. Felly, gallwn arsylwi ar y sbesimen nid oherwydd goleuo o'r ffynhonnell golau, ond oherwydd y fflworoleuedd a allyrrir ar ôl y sylweddau fflworoleuol yn y sbesimen amsugno'r excitation light.It yn dilyn bod y nodwedd allweddol o microsgop fflworoleuedd yw bod yn rhaid i'w ffynhonnell golau ddarparu golau excitation o donfedd penodol, sy'n galluogi'r sylweddau fflworoleuol i allyrru digon o fflworoleuedd yn y sbesimen dwysedd. Yn y cyfamser, rhaid i ficrosgop fflworoleuedd gynnwys system hidlo bwrpasol. Mae'r microsgop fflworoleuedd yn offeryn sylfaenol ar gyfer histocemeg imiwn-fflworoleuedd. Yn bennaf mae'n cynnwys ffynhonnell golau pwysedd uchel iawn, setiau hidlo (gan gynnwys hidlwyr cyffro a rhwystr), system optegol a chydrannau ategol. Mae'n defnyddio golau o donfedd penodol i gyffroi fflworoffores.
Mae dau ddull cyffroi wedi'u dosbarthu yn ôl ystod tonfedd: y dull excitation UV (dull arbelydru uwchfioled) a'r dull excitation BV (dull excitation glas-fioled).
Dull excitation UV: Defnyddir golau uwchfioled bron yn fyrrach na 400 nm ar gyfer cyffro. Nid oes unrhyw olau cyffro gweladwy yn bodoli yn y dull hwn. Mae'r fflworoleuedd a arsylwyd yn dangos fflworoleuedd cynhenid y llifyn, gan ei gwneud hi'n hawdd gwahaniaethu rhwng fflworoleuedd penodol ar y sbesimen ac awtofflworoleuedd y meinwe cefndir.
Dull cyffroi BV: Perfformir cyffro gyda golau wedi'i ganoli ar 404 nm a 434 nm, yn amrywio o uwchfioled i las-fioled. Mae golau glas yn arbelydru'r sbesimen yn y dull hwn. Felly, rhaid i hidlydd rhwystr y system arsylwi fflworoleuedd rwystro golau glas yn llwyr wrth drosglwyddo'r fflworoleuedd gwyrdd a melyn gofynnol. Fe'i defnyddir ar gyfer fflworocromau mewn profion imiwnfflworoleuedd. Gan fod tonfedd amsugno uchaf y fflworocrom yn agos at donfedd excitation y dull BV, gellir defnyddio golau glas fel y golau cyffro, gan arwain at effeithlonrwydd amsugno golau uchel y fflworochrome a delweddau cymharol glir. Ei anfantais yw na ellir arsylwi fflworoleuedd ar donfeddi o dan 500 nm, a dim ond signalau fflworoleuedd uwchlaw 500 nm y gellir eu harddangos ar y ddelwedd. Mewn profion imiwnfflworoleuedd, mae fflworocromau yn cael eu hadnabod yn rhannol yn ôl eu lliw. Felly, pan drafodir penodoldeb cynnil, mae anfantais uchod y dull excitation BV yn cael effaith sylweddol.
