Microsgop fflworoleuedd a gwahaniaethau a nodweddion microsgop optegol cyffredin
Mae microsgop fflworoleuedd a microsgop optegol cyffredin yn wahanol, nid trwy oleuo'r ffynhonnell golau cyffredin i arsylwi ar y sbesimen, ond y defnydd o donfedd penodol o olau (fel arfer uwchfioled, golau glas-fioled) excitation deunydd fflwroleuol o fewn y sbesimen o dan y microsgop, fel nad yw fflworoleuedd ffynhonnell golau microsgop fflworoleuedd yn chwarae goleuo uniongyrchol, ond fel math o gyffro o ddeunydd fflwroleuol o fewn sbesimen y ffynhonnell ynni. Nid goleuo'r ffynhonnell golau yw'r rheswm pam y gallwn arsylwi ar y sbesimen, ond y ffenomen fflworoleuedd a gyflwynir gan y deunydd fflwroleuol yn y sbesimen ar ôl amsugno egni golau cyffro. Gellir gweld bod nodweddion y microsgop fflworoleuedd, yn bennaf ei ffynhonnell golau yn gallu cyflenwi nifer fawr o amrediad tonfedd penodol y golau excitation, fel y gall y deunydd fflwroleuol o fewn y sbesimen a archwiliwyd gael y dwyster angenrheidiol y golau excitation. Ar yr un pryd, rhaid i'r microsgop fflworoleuedd gael system hidlo cyfatebol. Y microsgop fflworoleuedd yw'r offeryn sylfaenol ar gyfer histocemeg fflworoleuedd. Mae'n cynnwys ffynhonnell golau pwysedd uchel iawn, system hidlo (gan gynnwys plât hidlo cyffro ac atal), system optegol a system ffotograffig a chydrannau mawr eraill, yw defnyddio tonfedd benodol o olau i ysgogi'r sbesimen i allyrru fflworoleuedd.
1. y ffordd o excitation fflworoleuedd: yn ôl yr ystod tonfedd o olau wedi'i rannu'n ddull excitation UV (gan ddefnyddio goleuo uwchfioled) a dull excitation BV (gan ddefnyddio golau fioled glas) dau fath o ddull excitation UV yn fyrrach na 400nm ger golau uwchfioled ar gyfer cyffro. Nid oes golau excitation gweladwy yn y dull hwn, felly mae'r fflworoleuedd a arsylwyd yn dangos fflworoleuedd cynhenid y llifyn, ac mae'n hawdd gwahaniaethu rhwng y fflworoleuedd penodol ar y sbesimen a hunan-fflworoleuedd y meinwe cefndir.
2. Dull excitation BV: Mae'r dull wedi'i ganoli ar 404nm, 434nm o uwchfioled i olau glas ar gyfer cyffro. Mae'r dull hwn yn defnyddio golau glas i arbelydru'r sbesimen, felly mae'n rhaid i hidlydd torri'r system arsylwi fflworoleuedd ddefnyddio hidlydd a all rwystro'r golau glas yn llwyr a gall basio'r fflworoleuedd gwyrdd a melyn a ddymunir yn ddigonol. Pigmentau fflwroleuol ar gyfer y dull gwrthgorff fflwroleuol. Gan fod tonfedd amsugno uchaf y golau excitation a thonfedd yr allyriad uchaf o'r fflworoleuedd yn agos at ei gilydd, rhaid i'r hidlwyr a ddefnyddir yn y dull cyffroi BV fod yn hidlwyr torri sydyn. Mae'r dull hwn yn defnyddio golau glas fel y golau excitation, felly mae effeithlonrwydd amsugno'r fflworocrom yn uwch a gellir cael delwedd fwy disglair. Yr anfantais yw na ellir gweld fflworoleuedd o dan 500 nm, ac uwchlaw 500 nm mae'r ddelwedd gyfan yn ymddangos yn felyn. Yn y dull gwrthgorff fflwroleuol, mae'r rhan fwyaf o'r penodoldeb yn cael ei farnu gan liw unigryw'r fflworocrom, felly mae anfanteision y dull cyffroi BV a ddisgrifir uchod yn tueddu i fod yn hynod ddylanwadol wrth drafod penodoldeb cynnil.
